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化學(xué)發(fā)光免疫法與放射免疫法檢測AFP的比較

時(shí)間:2012-01-18   訪(fǎng)問(wèn)量:4716

羅煒(廣州呼吸病研究所)
王慧 陳柏銘(廣州醫學(xué)院第一附屬醫院檢驗科)

       摘要 本文采用放射免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫法平行測定60例臨床送檢血清標本的甲胎蛋白(AFP)含量,結果表明兩法的相關(guān)性良好(r=0.995),但化學(xué)發(fā)光免疫法的精密度和準確性均優(yōu)于放射免疫法。

       關(guān)鍵詞 化學(xué)發(fā)光免疫法 放射免疫法 甲胎蛋白

       臨床檢測血清AFP常規多采用放射免疫法,而近年發(fā)展起來(lái)的化學(xué)發(fā)光免疫法因其快速、精確、重現性好及試劑安全無(wú)毒的特點(diǎn),顯示出很好的應用前景[1]。為進(jìn)一步了解化學(xué)發(fā)光免疫法的特點(diǎn),本文報告用放射免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫法對比檢測60例臨床血清標本中AFP的含量,并對結果進(jìn)行統計分析和比較。

       材料和方法

       一、標本 隨機抽取60例臨床送檢血清標本。

       二、儀器和方法 放射免疫法使用上海的SN-682型γ計數儀,中國原子能科學(xué)研究所的AFP試劑盒?;瘜W(xué)發(fā)光免疫法使用美國Chiron公司的ACS180全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀和配套試劑盒。其測定原理為以吖啶酯作為發(fā)光底物,采用雙抗體夾心模式[2],即標本中的AFP抗原與固相中的單克隆AFP抗體結合,再與液相中以吖啶酯標記的多克隆AFP抗體結合。因待測AFP抗原總量與儀器測得的發(fā)光單位量(RLUs)存在正比的關(guān)系,由此求出AFP的含量。

       結  果

       一、線(xiàn)性實(shí)驗 將標準液按不同的濃度稀釋后做線(xiàn)性實(shí)驗,結果顯示放射免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫法分別在5~400 ng/ml和2~940 ng/ml范圍內呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。

       二、對比實(shí)驗 用上述兩法同時(shí)對受檢血清標本進(jìn)行定量分析。結果表明,兩法無(wú)顯著(zhù)差異(P>0.05),相關(guān)系數r=0.995,直線(xiàn)回歸方程Y=-1.058+0.920X,提示兩法呈良好相關(guān)性。

       三、回收實(shí)驗 取不同濃度的混合血清(AFP濃度為18.6,26.7,35.3 ng/ml),分別加入不同濃度的定值血清,用放射免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫法測得的回收率分別為90.2~109.0%和91.0~107.3%,平均回收率為95.7%和96.4%。

       四、精密度實(shí)驗 用兩法對低、中、高值質(zhì)控品分別進(jìn)行精密度實(shí)驗。附表中的結果表明化學(xué)發(fā)光免疫法的重復性較好。

附表 兩法的精密度對比

  批內CV% 批間CV%

放射免疫法 化學(xué)發(fā)光免疫法 放射免疫法 化學(xué)發(fā)光免疫法
低值 5.27 3.20 6.55 3.40
中值 5.00 2.48 5.30 3.31
高值 4.50 3.50 5.38 4.71

       討  論

       化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)既具有發(fā)光檢測的高度敏感性,又具有免疫分析的高度特異性[3]。本文檢測AFP結果提示放射免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫法之間無(wú)顯著(zhù)差異(P>0.05),相關(guān)性好(r=0.995)。顯示化學(xué)發(fā)光免疫法在敏感性、特異性方面不僅可與放射免疫法相媲美,而且化學(xué)發(fā)光免疫法的準確性、精密度和試劑盒的有效期等方面均優(yōu)于放射免疫法。由于化學(xué)發(fā)光免疫法是以化學(xué)發(fā)光劑作為標記物進(jìn)行定量檢測,所以其試劑具有穩定和無(wú)毒性的優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗使用的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀可以直接對血清標本進(jìn)行采樣,處理和檢測,標本可以隨到隨測,短時(shí)間內出結果,較放免法大大縮短了時(shí)間,能充分滿(mǎn)足臨床的需要。因此本文認為,化學(xué)發(fā)光免疫法可廣泛應用于臨床項目的檢測。 

       參考文獻 

       [1]陶義訓主編.免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗.第二版.北京:人民衛生出版社,1997∶174
       [2]章谷生.發(fā)光分析和發(fā)光免疫技術(shù).余傳霖等主編.現代醫學(xué)免疫學(xué).上海:上海醫科大學(xué)出版社,1999∶716
       [3]張麗民.化學(xué)發(fā)光標記及發(fā)光免疫分析.基礎醫學(xué)與臨床.1995;15(4)∶247

 


                                                                                                                                                                 文章來(lái)源;陽(yáng)光檢驗


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