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省人民醫院院檢驗中心開(kāi)展核酸反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)

作者:超級管理員 2014-08-23 12:30:01 來(lái)源:瀏覽量3077

    反向斑點(diǎn)雜交是利用生物素等標記的探針與特異性擴增PCR產(chǎn)物(靶DNA序列)雜交的新型技術(shù)。此項技術(shù)一次雜交就可以判斷某一基因座位的大部分或全部等位基因,廣泛用于基因分型、病原體檢測、腫瘤研究等。為滿(mǎn)足臨床和患者需要,我院檢驗中心全自動(dòng)核酸分子雜交儀將于2014年8月正式投入使用,現將開(kāi)展項目介紹如下:

開(kāi)展丙型肝炎病毒(HCV)基因分型,應用反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)檢測中國常見(jiàn)的1b、2a、3a、3b和6a五種亞型。不同的HCV亞型與病程發(fā)展和治療應答相關(guān),根據分型判定治療的難易,制定對應的抗病毒治療個(gè)體化方案。不同亞型感染引起臨床過(guò)程與干擾素,利巴韋林的治療反應與治療用量不同。

(1)HCV基因分布存在著(zhù)地理、人群差異,因此當HCV在人群中爆發(fā)時(shí),基因分型可作為追查其根源的有效工具。HCV 主要傳播途徑是直接與患者血液接觸,通過(guò)對不同人群HCV分子學(xué)研究,使包括垂直傳播與性傳播在內的HCV其他傳播途徑受到廣泛關(guān)注,并證實(shí)HCV可在結腸鏡檢查時(shí)于患者一患者問(wèn)傳播。

(3)感染了HCV 后,絕大多數(80%)患者不能自行清除,而發(fā)展為慢性肝炎。研究基因分型在急性感染轉變成慢性HCV中的作用,發(fā)現92%1b型急性感染患者會(huì )進(jìn)展為慢性化,而其他類(lèi)型僅35%~50%。而這一現象已成為研究的焦點(diǎn)。

(5)對干擾素治療的應答: 自從發(fā)現HCV以來(lái),對預測干擾素長(cháng)期應答相關(guān)因素的發(fā)現是一重大貢獻。多項臨床研究表明,對α-干擾素抗病毒治療應答性有影響的常見(jiàn)因素包括年齡、病程、肝硬化、基因型和HCV RNA血清水平。多元分析表明lb型、高水平的HCV RNA是唯一對α-干擾素治療無(wú)應答的獨立性預測因子。普通干擾素治療24周,2型的患者對于擾素的完全應答占60%-70%,而1型患者僅占10%-15%。

適用于丙型肝炎病毒感染患者的各臨床科室。

    真空干燥采血管(生化管),采集患者靜脈血3-4ml(HCV-RNA熒光定量檢測結果>1x103),2h內送檢;48h內4-8℃保存。

     丙型肝炎病毒(HCV)基因分型。

開(kāi)展人乳頭瘤病毒(HPV)基因分型,定性并分型檢測宮頸脫落細胞樣本和生殖泌尿道分泌物中人乳頭瘤病毒(HPV)常見(jiàn)的28個(gè)基因型別,包括:15 種高危型別:16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68,73,82(MM4);3 種疑似高危型別:26,53,66;10 種低危型別:6,11,40,42,43,44,54,61,81(cp8304),83(MM7)。

人乳頭瘤病毒系空泡病毒A屬,是球形DNA病毒,能引起人體皮膚黏膜的鱗狀上皮增殖。表現為尋常、生殖器疣(尖銳濕疣)等癥狀。 隨著(zhù)性病中尖銳濕疣的發(fā)病率急速上升和宮頸癌、肛門(mén)癌等的增多,人乳頭瘤病毒感染越來(lái)越引起人們的關(guān)注。目前已分離出130多種亞型,其中40多種與宮頸癌發(fā)病相關(guān)。因此,有針對性地進(jìn)行HPV 的分型檢測,對于HPV的臨床診斷和宮頸癌的早期預防有重要的意義,可廣泛用于臨床診斷和女性體檢。   

 適用于人乳頭瘤病毒感染患者的各臨床科室。

(1)適用標本類(lèi)型:宮頸脫落細胞樣本和生殖泌尿道分泌物。

(3)標本采集:

女性尿道樣本:首先使用無(wú)菌生理鹽水棉球洗凈尿道口,再用棉拭子插入尿道約2CM,然后捻動(dòng)拭子,最后將拭子放入細胞保存液中,密閉送檢。采集尿道樣本時(shí),受檢者必須在采集前2 個(gè)小時(shí)禁止小便。

標本應立即用于測試,4℃保存不應超過(guò)1 個(gè)星期, -20℃保存不應超過(guò)3 個(gè)月。

     人乳頭瘤病毒基因分型。

1. 檢測地點(diǎn):門(mén)診七樓檢驗中心分子生物實(shí)驗室。

2. 聯(lián)系電話(huà):0931-8281223。


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